實現(xiàn)超靈敏診斷的改良ELISA法的新進展
數(shù)字化ELISA
數(shù)字ELISA是大約10年前作為一種超靈敏的檢測技術(shù)發(fā)展起來的。當(dāng)在毫微微升大小的微孔陣列中實現(xiàn)酶反應(yīng)時，在非常低的目標(biāo)濃度下可以檢測到累積的產(chǎn)物，從而實現(xiàn)單分子檢測。利用ELISA檢測到甲型流感病毒重組核蛋白的毫微摩爾濃度。應(yīng)用帶有膠體金的雙功能熒光磁性納米球(AuNPs)建立了檢測Q流感病毒的ELISA。該方法的檢出限為7.8fg/mL。已經(jīng)被描述為數(shù)字化ELISA。
Akama及其同事開發(fā)了一種由數(shù)字ELISA修改的高靈敏度檢測方法，該方法沒有清洗和信號擴增，他們稱之為數(shù)字均勻非酶免疫吸附試驗。該方法檢測到前列腺特異性抗原的含量為0.093 pg/mL，而商業(yè)化的高靈敏ELISA檢測到0.84pg/mL，數(shù)字化ELISA檢測到0.055 pg/mL。